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2025年09月11日 14:25 來源:
定義與功能
熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-Dextran)是一種將熒光素異硫氰酸酯(FITC)共價連接至葡聚糖(Dextran)多糖鏈上的熒光標(biāo)記聚合物,英文名稱為FITC-Dextran。該產(chǎn)品結(jié)合了葡聚糖的生物惰性與FITC的強熒光特性,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究中作為示蹤劑。其主要功能包括評估細(xì)胞膜通透性、研究血管通透性、追蹤藥物遞送系統(tǒng)以及作為分子量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行擴散實驗。由于葡聚糖本身不易被細(xì)胞代謝且生物相容性高,FITC標(biāo)記后可在活體或體外系統(tǒng)中長時間穩(wěn)定示蹤。FITC-Dextran被廣泛用于炎癥、腫瘤血管生成、血腦屏障完整性等研究領(lǐng)域,是血管通透性檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”工具之一,為理解生理與病理過程提供了直觀的熒光可視化手段。
熒光特性與光學(xué)表現(xiàn)
熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-Dextran)在藍(lán)光激發(fā)下發(fā)出明亮的綠色熒光,其最大激發(fā)波長約為494 nm,最大發(fā)射波長約為521 nm,與標(biāo)準(zhǔn)FITC濾光片完全兼容。該熒光信號強度高、靈敏度好,適用于共聚焦顯微鏡、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀和酶標(biāo)儀等多種檢測平臺。由于其發(fā)射光位于可見光綠光區(qū),背景干擾較低,成像清晰。不同分子量的FITC-Dextran產(chǎn)品可提供從數(shù)kDa到數(shù)百萬Da的示蹤范圍,滿足不同孔徑模型(如細(xì)胞間隙、毛細(xì)血管壁)的研究需求。其熒光在生理pH下穩(wěn)定,但在強堿性或長時間光照下可能發(fā)生光漂白,因此建議避光操作。FITC-Dextran(FITC-Dextran)的綠色熒光使其成為多色成像實驗中的理想通道之一。
結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成
熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-Dextran)由兩部分構(gòu)成:葡聚糖骨架和共價偶聯(lián)的FITC分子,英文名稱為FITC-Dextran。葡聚糖是一種由葡萄糖單元通過α-1,6-糖苷鍵連接而成的天然多糖,具有高度水溶性和生物相容性。FITC通過其異硫氰酸酯基團(tuán)(-N=C=S)與葡聚糖上的游離氨基或羥基反應(yīng),形成穩(wěn)定的硫脲鍵,實現(xiàn)共價連接。每個葡聚糖分子可標(biāo)記多個FITC分子,標(biāo)記程度(degree of substitution)可根據(jù)應(yīng)用需求調(diào)控。該結(jié)構(gòu)賦予FITC-Dextran大分子特性,使其不易穿過完整細(xì)胞膜,常用于標(biāo)記細(xì)胞外空間或血管腔。不同分子量(如4 kDa、70 kDa、500 kDa)的產(chǎn)品可用于模擬不同尺寸分子的擴散行為,廣泛應(yīng)用于滲透性研究。
理化性質(zhì)與穩(wěn)定性
熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-Dextran)具有優(yōu)良的水溶性,可直接溶于水、緩沖液(如PBS)或細(xì)胞培養(yǎng)基,形成澄清溶液,無需助溶劑。其英文名稱為FITC-Dextran。產(chǎn)品通常以凍干粉形式提供,4°C避光保存可長期穩(wěn)定;配制后的溶液建議短期使用并避免反復(fù)凍融。FITC-Dextran在pH 6–8范圍內(nèi)熒光穩(wěn)定,強酸或強堿環(huán)境可能導(dǎo)致熒光淬滅或糖鏈降解。該分子具有良好的熱穩(wěn)定性,且不易被常見酶類快速降解,適合長時間動態(tài)觀測。由于其大分子特性,不易被細(xì)胞主動攝取,主要通過胞吞或被動擴散進(jìn)入細(xì)胞,因此常用于評估內(nèi)吞途徑或屏障功能。其低毒性與高生物相容性使其適用于體外細(xì)胞實驗及活體動物成像。
應(yīng)用優(yōu)勢與主要功能
熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-Dextran)的核心優(yōu)勢在于其高水溶性、強熒光、低毒性及可調(diào)控的分子量,英文名稱為FITC-Dextran。它被廣泛用于血管通透性檢測,如研究炎癥或腫瘤組織中血管滲漏;也可作為內(nèi)吞示蹤劑,觀察細(xì)胞吞噬過程;在組織工程中用于評估支架材料的擴散性能。此外,不同分子量的FITC-Dextran可構(gòu)建分子篩模型,研究腎小球濾過、血腦屏障完整性等生理屏障功能。其熒光信號易于檢測,定量分析便捷,是標(biāo)準(zhǔn)化實驗的理想工具。FITC-Dextran還可用于校準(zhǔn)熒光儀器或作為陽性對照,確保實驗重復(fù)性與準(zhǔn)確性,是生命科學(xué)研究中不可或缺的多功能熒光探針。
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