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2025年09月11日 14:19 來源:
定義與功能
水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS),英文名稱為Sulfo-CY5-NHS ester,是一種專為生物分子標記設(shè)計的近紅外熒光試劑。該產(chǎn)品由磺化CY5染料與N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活性基團共價連接而成,能夠在溫和條件下高效地與伯胺基團(-NH?)發(fā)生反應(yīng),如蛋白質(zhì)、抗體、多肽或氨基修飾核酸中的賴氨酸殘基或N端氨基。其主要功能是實現(xiàn)水相體系中的熒光標記,無需有機溶劑助溶,極大提升了生物分子的標記效率與穩(wěn)定性。Sulfo-CY5-NHS廣泛應(yīng)用于免疫熒光、Western blot、流式細胞術(shù)、活體成像及生物傳感器構(gòu)建,是現(xiàn)代分子探針技術(shù)中不可或缺的工具之一,特別適用于對水溶性和生物相容性要求高的實驗場景。
熒光特性與光學表現(xiàn)
水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS)在激發(fā)波長約為649 nm處吸收最強,發(fā)射峰位于約670 nm,屬于近紅外(NIR)光區(qū)。其英文名稱Sulfo-CY5-NHS ester準確反映了其化學結(jié)構(gòu)與功能。該紅色至近紅外熒光具有良好的組織穿透能力,能有效避開生物樣本的自發(fā)熒光干擾,顯著提高信噪比和檢測靈敏度。標記后的偶聯(lián)物熒光強度高、光穩(wěn)定性好,適合長時間成像和多色檢測。其發(fā)射波長與Cy5、Alexa Fluor 647等通道兼容,便于在現(xiàn)有熒光設(shè)備上直接使用。由于近紅外光對細胞毒性低,Sulfo-CY5-NHS特別適用于活細胞動態(tài)追蹤和小動物活體成像研究,為高分辨率生物成像提供強有力支持。
結(jié)構(gòu)與化學組成
水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS)的分子結(jié)構(gòu)包含三個關(guān)鍵部分:磺化CY5花菁染料、間隔臂(spacer)和N-羥基琥珀酰亞胺酯(NHS ester)反應(yīng)基團。其英文名稱Sulfo-CY5-NHS ester明確指出了其水溶性(sulfo-)和活性酯特性?;撬峄鶊F的引入顯著增強其在水溶液中的溶解度,避免了傳統(tǒng)CY5-NHS因疏水性導致的聚集和沉淀問題。NHS酯基團具有高度親電性,可在pH 7.5–8.5條件下與伯胺快速反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵,偶聯(lián)效率高。整個分子經(jīng)過純化驗證,確保批次一致性。這種結(jié)構(gòu)設(shè)計使其成為一種高效、可靠的水相熒光標記工具,適用于多種生物大分子的共價修飾。
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