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2025年09月09日 11:47 來(lái)源:
水溶性-C5.5-炔基是一種結(jié)合近紅外熒光染料Cyanine5.5(CY5.5)與炔基(-C≡CH)基團(tuán)的水溶性化合物。其核心優(yōu)勢(shì)在于“熒光-點(diǎn)擊化學(xué)”雙功能設(shè)計(jì):CY5.5提供近紅外二區(qū)(NIR-II,約700 nm)的深紅色熒光,穿透力強(qiáng)、背景噪聲低;炔基基團(tuán)則可通過(guò)“銅催化疊氮-炔環(huán)加成反應(yīng)”(CuAAC)與含疊氮(-N?)的分子高效共價(jià)結(jié)合。相較于傳統(tǒng)標(biāo)記方法(如氨基與羧基偶聯(lián)),點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)條件溫和(常溫、中性pH)、速度快(分鐘級(jí)完成),且產(chǎn)物穩(wěn)定性高,尤其適用于對(duì)溫度或pH敏感的生物分子(如抗體、核酸)標(biāo)記。
CY5.5的熒光發(fā)射波長(zhǎng)(約700 nm)位于近紅外二區(qū),這一波段的光可穿透生物組織(如皮膚、肌肉)數(shù)毫米至厘米級(jí),且生物體自身熒光(如血紅蛋白、脂質(zhì))在此區(qū)域干擾極低。實(shí)驗(yàn)表明,使用Sulfo-CY5.5-Alkyne標(biāo)記的抗體在活體小鼠腫瘤模型中,可清晰區(qū)分腫瘤邊界與正常組織,信噪比比傳統(tǒng)可見(jiàn)光染料(如FITC)提升10倍以上。此外,其熒光量子產(chǎn)率(約30%)與光穩(wěn)定性(半衰期>10小時(shí))顯著優(yōu)于同類近紅外染料(如ICG),滿足長(zhǎng)時(shí)間動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)需求。
· 生物成像:標(biāo)記抗體或肽段,實(shí)現(xiàn)腫瘤、炎癥等疾病的活體熒光成像;
· 蛋白質(zhì)組學(xué):通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)標(biāo)記新合成蛋白質(zhì),追蹤翻譯后修飾動(dòng)態(tài);
· 藥物開(kāi)發(fā):標(biāo)記藥物分子,研究其在細(xì)胞內(nèi)的分布與代謝途徑;
· 材料科學(xué):修飾納米顆粒(如金納米棒、量子點(diǎn)),構(gòu)建熒光-磁性雙模態(tài)探針。
例如,在阿爾茨海默病研究中,科學(xué)家利用Sulfo-CY5.5-Alkyne標(biāo)記β-淀粉樣蛋白探針,通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)與患者腦脊液中的目標(biāo)蛋白結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了疾病標(biāo)志物的超靈敏檢測(cè)(檢測(cè)限低至pM級(jí))。
分子結(jié)構(gòu)由三部分組成:CY5.5發(fā)色團(tuán)、短鏈聚乙二醇(PEG)連接臂和末端炔基。PEG連接臂不僅增強(qiáng)分子柔韌性,減少空間位阻,還通過(guò)疏水屏蔽效應(yīng)降低非特異性吸附;磺酸基團(tuán)(-SO?H)賦予分子強(qiáng)水溶性,可直接溶于生理緩沖液(如PBS),避免有機(jī)溶劑(如DMSO)對(duì)生物樣本的損傷。
理化性質(zhì)方面,該分子在pH 4-10范圍內(nèi)穩(wěn)定,對(duì)離子強(qiáng)度(如高鹽緩沖液)耐受性良好;儲(chǔ)存時(shí)需避光、干燥,并在-20°C以下保存以防止光降解。其反應(yīng)活性受銅催化劑濃度影響較小,10 μM CuSO?即可實(shí)現(xiàn)高效點(diǎn)擊反應(yīng),顯著降低金屬離子對(duì)生物分子的潛在毒性。
傳統(tǒng)熒光標(biāo)記需多步純化(如透析、色譜分離),而Sulfo-CY5.5-Alkyne的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)率高(>90%),副產(chǎn)物少,標(biāo)記后僅需簡(jiǎn)單離心即可去除未反應(yīng)試劑。此外,其水溶性設(shè)計(jì)消除了脂溶性染料易聚集導(dǎo)致的熒光淬滅問(wèn)題,標(biāo)記后的生物分子(如抗體)活性保留率>95%。在高通量篩選或臨床診斷中,該產(chǎn)品可顯著縮短實(shí)驗(yàn)周期(從數(shù)天縮短至數(shù)小時(shí)),同時(shí)降低操作誤差,為科研與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)提供高效工具。
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