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Sulfo-Cy3.5 NHS Ester,磺酸基-Cy3.5-乙基琥珀酰亞胺酯,CY3.5-NHS-Sulfo,經(jīng)典熒光標(biāo)記推薦

2025年09月06日 11:51 來源:

中文名稱:磺酸基-Cy3.5-乙基琥珀酰亞胺酯
英文名稱Sulfo-Cy3.5 NHS Ester

一、產(chǎn)品定義與核心功能

Sulfo-Cy3.5 NHS Ester是一種高性能的近紅外熒光染料,通過乙基琥珀酰亞胺酯(NHS Ester)活性基團(tuán)與生物分子(如蛋白質(zhì)、抗體、核酸)的氨基(-NH?)高效共價結(jié)合,實現(xiàn)靶向標(biāo)記。其核心優(yōu)勢在于近紅外發(fā)射波長(694 nm),可穿透深層組織并減少生物背景自發(fā)熒光干擾,廣泛應(yīng)用于生物成像、流式細(xì)胞術(shù)及分子檢測領(lǐng)域。

二、熒光特性與成像優(yōu)勢

· 熒光顏色:發(fā)射波長為694 nm,呈現(xiàn)明亮的橙紅色至近紅外熒光,與常見的綠色(FITC)或紅色(Cy3)染料形成互補(bǔ),支持多色標(biāo)記實驗。

· 光穩(wěn)定性:在激光連續(xù)照射下,熒光信號衰減率低于5%/小時,是傳統(tǒng)Cy3染料的2倍,適合長時間動態(tài)觀測。

· 消光系數(shù)高:摩爾消光系數(shù)達(dá)250,000 M?1cm?1,即使低濃度標(biāo)記也能產(chǎn)生強(qiáng)信號,降低對生物樣本的毒性影響。

三、化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)特點

· 化學(xué)組成:由三部分構(gòu)成:

1. 磺酸基-Cy3.5花菁染料:提供近紅外熒光發(fā)射,磺酸基(-SO?H)增強(qiáng)水溶性并減少非特異性吸附。

2. 乙基琥珀酰亞胺酯(NHS Ester):活性基團(tuán),在pH 7.2-8.5條件下與氨基快速反應(yīng)(10-30分鐘完成)。

3. 聚乙二醇(PEG)鏈接臂(部分型號):增加空間位阻,減少標(biāo)記后生物分子的聚集。

· 結(jié)構(gòu)特點

· 水溶性優(yōu)異:磺酸基使染料在生理緩沖液(如PBS)中溶解度達(dá)10 mg/mL,無需有機(jī)溶劑助溶。

· 反應(yīng)特異性高NHS Ester僅與伯氨基反應(yīng),對酪氨酸、組氨酸等側(cè)鏈無交叉反應(yīng)。

四、應(yīng)用領(lǐng)域與典型場景

1. 活體成像

· 標(biāo)記腫瘤靶向抗體(如抗PD-L1),通過近紅外成像實時監(jiān)測藥物在腫瘤組織的富集情況。

2. 流式細(xì)胞術(shù)

· 多色標(biāo)記細(xì)胞表面標(biāo)志物(如CD4、CD8),區(qū)分T細(xì)胞亞群,靈敏度比傳統(tǒng)PE通道高10倍。

3. 蛋白質(zhì)組學(xué)

· 標(biāo)記重組蛋白后,通過SDS-PAGE或Western blot檢測蛋白表達(dá)水平,避免同位素標(biāo)記的輻射風(fēng)險。

五、使用優(yōu)勢與操作便捷性

· 反應(yīng)條件溫和:無需高溫或強(qiáng)酸強(qiáng)堿,4℃至室溫均可高效標(biāo)記。

· 標(biāo)記效率高1 mg抗體僅需0.5-1 μmol染料,成本較其他近紅外染料降低40%。

· 兼容性廣:支持與生物素、熒光素(FITC)等其他標(biāo)記物聯(lián)用,構(gòu)建多模態(tài)檢測體系。


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