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2023年07月10日 15:15 來源:http://www.ydxycg.com.cn/
液體核磁共振氫譜檢測的基本操作包括樣品的準備、檢測前儀器的調試、實驗參數(shù)的設定鎖場、調諧、勻場、數(shù)據采集和處理等幾個步驟。新維創(chuàng)生物溫馨提示:在進行核磁共振氫譜檢測時,禁止攜帶磁性卡、金屬物品(如機械手表、鋼瓶、鉗子等)以及安裝有心臟起搏器者進入檢測區(qū)域,以避免造成不必要的人身危險和財產損失。
第一步:樣品的準備
做核磁共振氫譜檢測所需樣品要比較純,一般情況下純度要求達到95%以上。為了得到分辨率很高的圖譜,應將樣品用溶劑溶解。溶液的濃度視儀器的靈敏度、化合物的分子量以及所測核磁共振圖譜的類型而定。樣品在氘代溶劑中應有較好的溶解性和穩(wěn)定性,用于檢測的樣品溶液中應避免有懸浮物和順磁性物質(如Fe3+、Cu2+等)。核磁管中的樣品溶液應保持一定高度以滿足檢測要求,通常高度為4~5cm。由于核磁共振氫譜檢測的是樣品分子中的氫原子核,因此做核磁共振圖譜測試所用溶劑本身最好不含氫,含氫的溶劑應是重氫試劑。常用的溶劑有:CDCl3、D2O、DMSO-d6、CD3COCD3、CD3OD、C6D6、C5D5N、CD3CN等。
第二步:檢測前儀器調試
檢測前應檢查所有與儀器相關的電源和供氣系統(tǒng)是否處于打開狀態(tài)。磁體中的液氮、液氦液面高度處于安全范圍。檢查儀器的溫度控制系統(tǒng),特別是探頭的溫度控制能夠滿足檢測需求。
第三步:檢測參數(shù)的設定
將樣品放入磁體后選擇需要檢測的一維(如1H或13C)或二維檢測,每一個核磁都有相應的標準脈沖序列所對應。應根據需要調整檢測譜圖寬度、掃描次數(shù)、相循環(huán)次數(shù)、弛豫時間、接收機增益值等重要參數(shù)。
第四步:鎖場
為了保證磁體所提供的靜磁場頻率不產生漂移,探頭通過鎖場通道不斷發(fā)射共振頻率來激發(fā)氘代溶劑產生氘信號,通過對氘信號的實時監(jiān)測實現(xiàn)對磁體頻率漂移的補償。應根據不同氘代溶劑選擇相應的鎖場參數(shù),通常儀器工作站軟件會提供一個觀察氘信號的窗口。
第五步:調諧
通過對探頭進行諧振調諧(tuning)和阻抗匹配調節(jié)(matching),實現(xiàn)諧振回路中諧振頻率與譜儀發(fā)射到探頭上的脈沖頻率完全一致,使探頭能夠接收所有的發(fā)射功率,從而獲得較好的信噪比。一般儀器工作站軟件會提供一個調諧窗口,通過“V”字形曲線左右和上下移動進行諧振調諧和阻抗匹配調節(jié)。
第六步:勻場
調節(jié)勻場線圈中X,Y,Z,Z2,XY,XZ,YZ等不同方向的磁場梯度來補償靜磁場的不均勻性,從而獲得分辨和靈敏度均滿意的測試結果。
第七步:數(shù)據采集和處理
儀器采集到的正常核磁共振信號是以指數(shù)形式衰減的自由衰減信號(FID),自由衰減信號是一種時域信號,通過傅里葉變換(FT)可以將時域信號轉換成頻域信號用于結構分析。數(shù)據處理過程包括傅里葉變換、相位調整、化學位移定標、標峰,一維核磁共振氫譜圖的處理還包括積分過程。
以上就是新維創(chuàng)生物對液體核磁共振氫譜檢測操作過程的分享,希望新維創(chuàng)的分享能夠幫助到各位。
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